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对于养细胞的小伙伴而言，拥有健康的细胞是一切研究工作的前提。细胞操作中，除了避免常见的细菌和真菌污染外，还得时刻提防不易察觉的支原体污染。

支原体很小，而且不会使培养基变浑浊。因此，您身边需要一个极具敏感性和广谱性的有用工具来对细胞进行频繁筛查。

什么是支原体

支原体是一种介于细胞和病毒之间，能独立生活的微生物，无细胞壁，形态呈多形性，最小的直径0.2um，可通过滤器，是细胞培养中很常见的一种污染源。支原体污染难以观察特殊的外观变化，培养液也不浑浊。因此轻度污染时，常常不易察觉。研究表明，支原体污染能耗尽营养物，促进代谢积累，导致pH改变，诱导或抑制细胞因子表达，并改变培养细胞的代谢、增殖特征及形态，被称为珍贵细胞系的“秘密入侵者”或“沉默的杀手“。由于支原体污染能影响几乎每一个细胞参数，所以很多研究都强调了常规筛选研究细胞系的需要，以确保观察到的结果不被污染所损害。

支原体检测方法

支原体常用的检测方法有培养法、DNA荧光染色法、免疫荧光染色法、PCR法等。

培养法是利用支原体能在培养基中繁殖的特性，通过观察典型菌落形态进行判断。该方法准确、可靠，但培养周期长，一般需要2-4周，且敏感性不高。到目前为止，仍有些支原体无法培养。

DNA荧光染色法是利用荧光染料能特异结合双链DNA将样本进行染色后，通过荧光显微镜观察是否出现支原体污染典型特征。由于支原体吸附在细胞上而不易上色，使用该方法常出现假阴性。

免疫荧光染色法将针对支原体共同抗原的荧光标记抗体与靶抗原结合后，通过荧光显微镜观察。该方法耗时长，且检出支原体种类有限。

ATCC广谱支原体检测试剂盒

以上方法操作繁琐，费时费力，而PCR以其快速、敏感、特异的优点被广泛用于支原体检测。ATCCUniversalMycoplasmaDetectionKit(ATCC?30-K?)采用PCR技术，为细胞培养过程中检测支原体污染提供了一种快速，灵敏的检测方法。试剂盒中提供的通用引物可与支原体基因组DNA16SrRNA编码区特异结合。试剂盒在设计扩增引物和反应条件时利用了密集的生物信息学分析，使可检测支原体种类从普通PCR相关产品的十余种迅速增加到超过60种，与如组织或细菌等其他模板无交叉反应。此试剂盒通过一个简单的PCR反应，能实现高度特异且全面的支原体种类检测，是细胞培养中检测支原体污染的有效工具。

该试剂盒可检测支原体属(Mycoplasma)、无胆甾原体属(Acholeplasma)、尿素原体属(UreaPlasma)、螺旋原体属(Spiroplasma)超过60种支原体。其中包括8种常见的细胞污染物（M.arginini,M.fermentans,M.hominis,M.hyorhinis,M.orale,M.pirum,M.salivarium,andA.laidlawi）。

简单快速

无需复杂设备，一个简单的PCR即可完成检测

结果特异

试剂盒中提供的引物与支原体基因组DNA16SrRNA编码区特异结合，无交叉反应

广谱

可同时检测出超过60种支原体

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