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病原微生物培养和
药敏报告单的解读
你也许常常疑惑
为什么微生物培养阳性
实际却没有感染?
为什么药敏结果敏感的药
治疗却无效?
别着急,咱们请
北京大学航天临床医学院
检验科杨靖娴老师
为我们讲解
病原微生物培养和
药敏报告单的解读
作者介绍
杨靖娴
北京大学航天临床医学院
检验科副主任技师
微生物组组长、医学硕士
北京中医药学会第三届中医检验委员会委员
主要工作领域:临床微生物学检验。主要研究方向为耐万古霉素肠球菌的分子流行病学研究。共发表研究论文数十篇,其中以第一作者发表SCI论文两篇。先后承担两项北京大学航天临床医学院院级课题,均已结题。
要点一
标本正确采集的重要性
一、从临床标本细菌与真菌检验流程看
标本采集是第一环节,对后续结果至关重要。
二、标本采集的两个关键词
1.正确
早期:采集时间在病程早期、症状典型时;在使用抗菌药物前;2h内送检。
无菌:无菌操作;无菌容器。
2.合理
慎送痰标本,多送血培养。
要点二
血培养结果解读
一、血液污染
1.定义:在多次血培养中单个血培养下列细菌阳性:凝固酶阴性葡萄球菌、棒状杆菌、微球菌、丙酸杆菌、芽孢杆菌。
2.说明:因经皮穿刺操作可使正常皮肤定植菌进入血液(健康血液是无菌的),从而导致血液被污染、血培养假阳性。
二、血培养结果解读-阳性
1.双侧培养报阳性:为同一病原菌,则不论任何细菌,绝大部分为病原菌。
2.单侧(瓶)报阳性
革兰阴性杆菌、金黄色葡萄球菌、β-溶血链球菌、肺炎链球菌、产单核李斯特菌、念珠菌等,90%以上为病原菌。
凝固酶阴性葡萄球菌、微球菌、芽孢杆菌、棒杆菌、气球菌、丙酸杆菌等,90%以上为污染。
三、血培养结果解读-阴性
1.真阴性
非感染性疾病
感染治愈
2.假阴性
采样不规范,采血量不足
(正确采血:2套/“双抽四瓶”,成人每瓶8-10ml,小儿每瓶1-5ml)
(注:①“1套”:一个穿刺点所采的所有瓶;②一个穿刺点一般2瓶:需氧瓶+厌氧瓶;③厌氧瓶内不仅长厌氧菌,还可长兼性厌氧菌)
抗菌药物影响
苛养菌(流感嗜血杆菌)
特殊病原体(衣原体、病毒)
标本中致病菌量少
检验人员技术、实验室条件
四、导管相关血流感染(catheterrelatedbloodstreaminfection,CRBSI)
1.诊断目前没有金标准。
2.配对血培养(导管与外周)阳性时间差>2h是诊断CRBSI最简单的方法。
3.拔管后抗菌药物治疗在24h内有效则提示CRBSI。
要点三
痰培养结果解读
一、痰培养
1.目的:诊断细菌性、真菌性肺炎。
2.现状:送检率最高,合格率最低。
3.存在的问题:
痰标本是必然被污染的标本。
检测血液、支气管肺泡灌洗液(BALF)更有诊断意义。
标本质量是关键。
二、痰培养结果解读-阳性
1.假阳性:可能是污染或定植。
痰标本可被上呼吸道、口腔污染。
说明:痰培养细菌一般有正常定植菌与致病菌之分,但长期住院患者,培养所得“致病菌”可为正常定植菌(如因长期卧床而食道反流等)。
2.合格痰标本
标准:镜下涂片结果——鳞状上皮细胞<10/LP(提示来自下呼吸道),白细胞>25/LP(提示感染)。
3.气管插管常致“合格假象”
原因:不经过口腔,故鳞状上皮细胞常10/LP;气管插管对呼吸道有刺激,白细胞常25/LP。
解决方法:
(1)气管插管时间24h,培养出病原菌,有诊断意义。
(2)插管时间24h,即使纯培养也仅有参考意义。因:医院环境中常见院感菌开始繁殖生长,培养出来的多数是污染菌、定植菌。
要点四
尿培养结果解读
一、尿培养易污染
1.如出现1-2种可能致病菌,认为其可信,分别进行鉴定和药敏。
2.如3种或以上可能致病菌,怀疑其被污染,建议重留尿标本。
二、尿标本采集方法
1.清洁中段尿:清洁外阴,中段尿标本直接留取在无菌容器中。
2.导管尿留置方法:
夹住导尿管10-20min;
用75%酒精消毒导管采集部位;
用注射器直接从尿管采集5-10ml尿液;
将尿液转入无菌容器中送检;
注:一定不要直接从尿袋中留取尿标本!
要点五
重视标本直接涂片的作用
优点:
1.确定致病菌:客观、真实。
2.快速疑诊:合格标本30min内可给予临床有用的信息,对于危重患者尤其有用!
3.覆盖面广:涂片既可见常规培养可长者,也可见常规培养不长或长得慢者。
4.结合培养结果:涂片真菌培养有“导航作用”,可修正培养结果,避免假阴性,剔除假阳性。
要点六
药敏试验基础知识介绍
一、概念
1.定义:用体外方法检测抗菌药物抑制/杀死细菌的效率,预测体内抗菌效果。
2.目的:指导目标治疗(个体),指导经验治疗(群体)。
3.“最低抑菌浓度”:
(minimalinhibitoryconcentration,MIC)抗菌药物能够抑制待测菌生长的最低浓度。
4.局限性:体外药物作用情况与体内不完全相同(例:药物浓度——在体外固定不变,在体内随时间改变),故只能部分预测药物在体内的疗效。
二、方法
1.纸片扩散法(K-B法):测抑菌圈直径,检验科以其作补充。
2.稀释法(肉汤、琼脂、仪器法):测MIC,检验科以仪器法为主。
3.E-Test:测MIC,昂贵,是少数抗生素的验证、特殊耐药表型的复核方法。
三、药敏试验的一般原则
1.检测获得性耐药,不必检测天然耐药。
2.预报药/指示药:以几种指示几类。
3.