精品课程22病原微生物培养和药敏

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病原微生物培养和

药敏报告单的解读

你也许常常疑惑

为什么微生物培养阳性

实际却没有感染?

为什么药敏结果敏感的药

治疗却无效?

别着急,咱们请

北京大学航天临床医学院

检验科杨靖娴老师

为我们讲解

病原微生物培养和

药敏报告单的解读

作者介绍

杨靖娴

北京大学航天临床医学院

检验科副主任技师

微生物组组长、医学硕士

北京中医药学会第三届中医检验委员会委员

主要工作领域:临床微生物学检验。主要研究方向为耐万古霉素肠球菌的分子流行病学研究。共发表研究论文数十篇,其中以第一作者发表SCI论文两篇。先后承担两项北京大学航天临床医学院院级课题,均已结题。

要点一

标本正确采集的重要性

一、从临床标本细菌与真菌检验流程看

标本采集是第一环节,对后续结果至关重要。

二、标本采集的两个关键词

1.正确

早期:采集时间在病程早期、症状典型时;在使用抗菌药物前;2h内送检。

无菌:无菌操作;无菌容器。

2.合理

慎送痰标本,多送血培养。

要点二

血培养结果解读

一、血液污染

1.定义:在多次血培养中单个血培养下列细菌阳性:凝固酶阴性葡萄球菌、棒状杆菌、微球菌、丙酸杆菌、芽孢杆菌。

2.说明:因经皮穿刺操作可使正常皮肤定植菌进入血液(健康血液是无菌的),从而导致血液被污染、血培养假阳性。

二、血培养结果解读-阳性

1.双侧培养报阳性:为同一病原菌,则不论任何细菌,绝大部分为病原菌。

2.单侧(瓶)报阳性

革兰阴性杆菌、金黄色葡萄球菌、β-溶血链球菌、肺炎链球菌、产单核李斯特菌、念珠菌等,90%以上为病原菌。

凝固酶阴性葡萄球菌、微球菌、芽孢杆菌、棒杆菌、气球菌、丙酸杆菌等,90%以上为污染。

三、血培养结果解读-阴性

1.真阴性

非感染性疾病

感染治愈

2.假阴性

采样不规范,采血量不足

(正确采血:2套/“双抽四瓶”,成人每瓶8-10ml,小儿每瓶1-5ml)

(注:①“1套”:一个穿刺点所采的所有瓶;②一个穿刺点一般2瓶:需氧瓶+厌氧瓶;③厌氧瓶内不仅长厌氧菌,还可长兼性厌氧菌)

抗菌药物影响

苛养菌(流感嗜血杆菌)

特殊病原体(衣原体、病毒)

标本中致病菌量少

检验人员技术、实验室条件

四、导管相关血流感染(catheterrelatedbloodstreaminfection,CRBSI)

1.诊断目前没有金标准。

2.配对血培养(导管与外周)阳性时间差>2h是诊断CRBSI最简单的方法。

3.拔管后抗菌药物治疗在24h内有效则提示CRBSI。

要点三

痰培养结果解读

一、痰培养

1.目的:诊断细菌性、真菌性肺炎。

2.现状:送检率最高,合格率最低。

3.存在的问题:

痰标本是必然被污染的标本。

检测血液、支气管肺泡灌洗液(BALF)更有诊断意义。

标本质量是关键。

二、痰培养结果解读-阳性

1.假阳性:可能是污染或定植。

痰标本可被上呼吸道、口腔污染。

说明:痰培养细菌一般有正常定植菌与致病菌之分,但长期住院患者,培养所得“致病菌”可为正常定植菌(如因长期卧床而食道反流等)。

2.合格痰标本

标准:镜下涂片结果——鳞状上皮细胞<10/LP(提示来自下呼吸道),白细胞>25/LP(提示感染)。

3.气管插管常致“合格假象”

原因:不经过口腔,故鳞状上皮细胞常10/LP;气管插管对呼吸道有刺激,白细胞常25/LP。

解决方法:

(1)气管插管时间24h,培养出病原菌,有诊断意义。

(2)插管时间24h,即使纯培养也仅有参考意义。因:医院环境中常见院感菌开始繁殖生长,培养出来的多数是污染菌、定植菌。

要点四

尿培养结果解读

一、尿培养易污染

1.如出现1-2种可能致病菌,认为其可信,分别进行鉴定和药敏。

2.如3种或以上可能致病菌,怀疑其被污染,建议重留尿标本。

二、尿标本采集方法

1.清洁中段尿:清洁外阴,中段尿标本直接留取在无菌容器中。

2.导管尿留置方法:

夹住导尿管10-20min;

用75%酒精消毒导管采集部位;

用注射器直接从尿管采集5-10ml尿液;

将尿液转入无菌容器中送检;

注:一定不要直接从尿袋中留取尿标本!

要点五

重视标本直接涂片的作用

优点:

1.确定致病菌:客观、真实。

2.快速疑诊:合格标本30min内可给予临床有用的信息,对于危重患者尤其有用!

3.覆盖面广:涂片既可见常规培养可长者,也可见常规培养不长或长得慢者。

4.结合培养结果:涂片真菌培养有“导航作用”,可修正培养结果,避免假阴性,剔除假阳性。

要点六

药敏试验基础知识介绍

一、概念

1.定义:用体外方法检测抗菌药物抑制/杀死细菌的效率,预测体内抗菌效果。

2.目的:指导目标治疗(个体),指导经验治疗(群体)。

3.“最低抑菌浓度”:

(minimalinhibitoryconcentration,MIC)抗菌药物能够抑制待测菌生长的最低浓度。

4.局限性:体外药物作用情况与体内不完全相同(例:药物浓度——在体外固定不变,在体内随时间改变),故只能部分预测药物在体内的疗效。

二、方法

1.纸片扩散法(K-B法):测抑菌圈直径,检验科以其作补充。

2.稀释法(肉汤、琼脂、仪器法):测MIC,检验科以仪器法为主。

3.E-Test:测MIC,昂贵,是少数抗生素的验证、特殊耐药表型的复核方法。

三、药敏试验的一般原则

1.检测获得性耐药,不必检测天然耐药。

2.预报药/指示药:以几种指示几类。

3.



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