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血流感染
预见支原体(2)
BRICS血流细菌监测
思考三
支原体感染检测方法
支原体检测方法及临床应用现状如何呢?临床微生物学手册对常见支原体检测方法做了综述。
(1)生殖道支原体
a镜检:生殖道液体经DNA荧光染料(赫斯特或吖啶橙)染后可能检出,但不特异;
b抗原检测:不建议用于诊断;
c分子生物学检测:PCR扩增也许是检测该病原体唯一可行的手段。目前欧洲已有商品化试剂盒;
d培养:生长条件尚未建立完善,但需长时间培养;
e血清学试验:已有MIF和Western免疫印迹法,然而尚未商品化。
(2)人型支原体(Mycoplasmahominis)
a镜检:体液经DNA荧光染料(赫斯特或吖啶橙)染色后可能检出,但不特异;
b抗原检测:尚无商品化产品可用;
c分子生物学检测:由于快速增殖,PCR方法虽已建立,但不及培养实用。商品化试剂盒可同时检测人型支原体(Mycoplasmahominis)、生殖道支原体(M.genitalium)、脲原体(Ureaplasma)属、阴道毛滴虫、沙眼衣原体(Chlamydiatrachomatis)和淋病奈瑟菌(Neisseriagonorrhoeae)
d培养:病原体可分离自各种临床标本。推荐使用涤纶或聚拭子,避免使用棉签。支原体极不稳定,应该使用适当的运送培养基。可在SP4肉汤和添加精氨酸的琼脂(最好)Shepard’s10B肉汤,或A8琼脂中复苏,2~4天生长;
e血清学试验:美国尚无商品化试剂且不推荐用于常规检测。
(3)肺炎支原体(Mycoplasmapneumoniae)
a镜检:体液经DNA荧光染料(赫斯特或吖啶橙)染色后可能检出,但不特异;
b抗原检测:不建议用于诊断;
c分子生物学检测:实时荧光定量PCR作为一种可选的方法具有高度的敏感度,与培养及血清学方法相比,临床研究显示其结果有可变性;美国和欧洲均已有商品化试剂盒可用;
e培养:各种临床标本中均可分离出此病原体。推荐使用涤纶或聚酯拭子,避免使用棉签。支原体极不稳定,应该使用适当的运送培养基。可在SP4葡萄糖肉汤或琼脂中复苏,需生长21天或更长时间。转种可促进生长。普遍认为用于确诊不敏感;
f血清学实验:与补体结合实验和IFA相比,EIA更为敏感和特异;血清抗体滴度增加4倍以上更具临床意义。但单份血清样品gM抗体检测可能有助于诊断。不推荐冷凝集试验用于肺炎支原体感染的诊断。
支原体检测方法的临床应用处于瓶颈期,少量支原体血症病例并不是有目的的筛查支原体而发现的,而是通过血培养的方法遇到的人型支原体。人型支原体可以在普通血琼脂上生长的。
思考四
目前微生物室针对支原体血流感染检测的现状与展望
医院针对怀疑支原体菌血症的患者,只能尝试血培养的方法,但血培养临床应用价值有限,只有人型支原体能通过常规培养的方法检测。普遍认为PCR检测方法具有很好的临床应用前景,我们可以更多的